Sviluppo di un saggio elettrochimico di immunoassorbimento enzimatico per la quantificazione di immunoglobuline umane

Abstract

Le immunoglobuline (Igs) sono glicoproteine in grado di dare una risposta specifica nei confronti di un antigene, svolgendo un ruolo fondamentale per il sistema immunitario. Le Igs possono essere quantificate tramite diverse tecniche strumentali come l’immunoturbidimetria, la nefelometria, la Western Blotting, la citometria a flusso ed ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay). I saggi di immunoassorbimento enzimatico, rispetto alle altre tecniche, hanno il vantaggio di poter essere integrati in sensori elettrochimici e quindi in dispositivi portatili. In questo lavoro di tesi è stato sviluppato un ELISA elettrochimico, basato sulla horseradish peroxidase (HRP), per la quantificazione di IgG umane. Con l’obbiettivo di migliorare la sensibilità del saggio e il limit of detection (LOD) sono state investigate: l’individuazione del miglior mediatore elettrochimico; la modifica della superficie dell’elettrodo di lavoro con nanomateriali; diverse tecniche di immobilizzazione dell’anticorpo di cattura. I risultati sperimentali sono stati valutati impiegando come tecniche analitiche la voltammetria ciclica, la cronoamperometria e la spettrofotometria UV/visibile. L’ELISA elettrochimico sviluppato ha mostrato prestazioni migliori rispetto alla controparte colorimetrica commerciale, prospettando l’applicazione dei risultati ottenuti per lo sviluppo di nuovi immunosensori elettrochimici.